Uno de los principales problemas a los que se enfrenta el corzo son las enfermedades y, entre ellas, la parasitación por Cephenemya stimulator, de carácter dependiente. Esta parasitosis ha sido señalada como uno de los factores implicados en la disminución de las poblaciones en todo el cuadrante noroccidental de la península ibérica (Galicia, Asturias, Cantabria y León, entre otros).

El objetivo principal del estudio es evaluar sistemas que permitan minimizar el impacto que tiene la Cephenemya stimulator sobre las poblaciones de corzo. Para ello, se plantean dos líneas principales de investigación. Por un lado, la identificación de feromona sexual del parásito y la evaluación de su potencial como herramienta de atracción y captura y, por otro, el desarrollo y ensayo de distintos sistemas de trampas de captura de adultos, con y sin la utilización de atrayentes específicos.

La identificación y caracterización de las feromonas sexuales será llevada a cabo por el Instituto de Química Avanzada de Cataluña (IQAC-CSIC), que analizará su posible aplicabilidad como posible sistema de captura del parásito.

Paralelamente, se evaluarán diferentes tipologías de trampas para la captura de adultos, incluyendo aquellas basadas en estímulos visuales (simulación de apariencia de corzo) y otras fundamentadas en estímulos químicos, mediante el uso de compuestos olorosos con capacidad atrayente.

• Obtención de material biológico

  El desarrollo de todo el planteamiento posterior está estrechamente ligado a la disponibilidad de insectos de manera recurrente, de manera que puedan desarrollarse todas las actividades sobre individuos adultos de edad y estado reproductivo conocidos. Ante la imposibilidad de criar C. stimulator de manera artificial, la obtención de adultos se basará en la obtención de larvas de último estadio (L3 maduras). La Asociación del Corzo Español (ACE) y Fundación Artemisan coordinarán este proceso mediante la elaboración de un protocolo específico de recogida, que será difundido a las instituciones colaboradoras y socios implicados.Una vez obtenidas, las larvas serán enviadas a las instalaciones del IQAC-CSIC, donde se prevé desarrollar una metodología viable que permita ala pupación y posterior emergencia de los adultos. Con el fin de aumentar el número de ejemplares disponibles, se realizará de manera paralela la captura directa de adultos en el medio natural, de acuerdo a su fenología.

• Estudio comportamental bajo condiciones de laboratorio.

  Esta actividad tiene por finalidad recabar evidencias sobre la existencia de señales químicas involucradas en la comunicación sexual de la especie, de manera que se obtenga también información sobre el sexo emisor de dichas señales. Esta información será de gran relevancia a la hora de los diseños experimentales considerados en las sucesivas actividades. Para ello, se registrará a efectos comparativos el comportamiento del insecto tanto en presencia de individuos del sexo contrario como del mismo sexo. Como variable adicional, se contemplará también registrar el comportamiento del insecto de acuerdo a distintas densidades de individuos del sexo contrario. Mediante un sistema de grabación de alta definición, se monitorizará el comportamiento de los individuos durante, al menos, 48 horas, bajo condiciones ambientales similares a las de mayor actividad de la especie en el entorno natural.

• Aislamiento e identificación de potenciales compuestos feromonales.

  Este objetivo se abordará empleando dos metodologías complementarias habitualmente empleadas en el estudio de la ecología química de insectos. Por un lado, se realizará el análisis de los compuestos presentes en la fracción volátil emitida por el insecto mediante las técnicas de análisis de espacio de cabeza y microextracción en fase sólida.

  Ambas metodologías sse aplicarán sobre individuos vírgenes – y preferentemente de edad controlada- tanto en presencia de individuos del mismo sexo como del sexo opuesto. Paralelamente, se llevará a cabo la caracterización del perfil cuticular de machos y hembras vírgenes a partir de extractos del cuerpo entero del insecto.

  Todas las muestras serán analizadas por cromatografía de gases acoplados a espectrometría de gases, e identificados a partir de librerías comerciales o estándares sintéticos cuando sea requerido. De ser necesario, la identificación de los compuestos se respaldará con técnicas adicionales de caracterización estructural, incluyendo la resonancia magnética nuclear y la espectroscopia infrarroja, para garantizar una identificación más completa.

• Determinación de la actividad biológica.

  Una vez identificados los compuestos específicos de cada sexo, se procederá a evaluar su posible actividad biológica mediante dos aproximaciones experimentales. En primer lugar, se determinará a través de técnicas electroantenográficas (p. ej. cromatografía de gases acoplada a detección electroantenográfica) cuáles de los compuestos presentes en las muestras de los potenciales compuestos feromonales son detectados por cada uno de los sexos. Una vez realizada esta discriminación, se evaluará la actividad de estos compuestos sobre el comportamiento del insecto. En caso de que se trate de compuestos químicos no accesibles de manera comercial, se procederá a su síntesis química para garantizar su disponibilidad. Los ensayos comportamentales serán llevados a cabo sobre individuos vírgenes de ambos sexos, a partir de metodologías diseñadas ex profeso de acuerdo a las características morfológicas del insecto.